- 陈云鹏;王磊;童亚林;刘亮;吕璐;莫永亮;詹球;阳齐琼;梁静;朱富军;龚震宇;辛海明;
目的:探讨人羊膜匀浆上清液(hAHS)对脂多糖(LPS)致伤的大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)增殖及其分泌促炎因子的影响。方法:用新鲜人羊膜制备hAHS,用考马斯亮蓝法和ELISA法分别测定hAHS中总蛋白和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白介素-4(IL-4)、IL-10、血管生成素-1(Ang-1)、人β-防御素2(HBD2)的含量。MTT法检测不同体积分数hAHS(0、10%、15%、20%、25%)作用于RPMVECs后细胞增殖活性的变化,确定hAHS促进RPMVECs增殖的最佳浓度。根据共培养条件不同,将RPMVECs随机分为4组:N组(10%FBS+DMEM/F12),A组(10%FBS+DMEM/F12+15%hAHS),B组(10%FBS+DMEM/F12+LPS)和C组(10%FBS+DMEM/F12+15%hAHS+LPS)。各组细胞在干预后0、12、24、48、72h用MTT法测定吸光度值(A值),并分别于培养6、8、10、12、24h时用ELISA法测定RPMVECs培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果:hAHS中总蛋白浓度为(725.125±12.625)mg/L,其中EGF、bFGF、VEGF、IL-4、IL-10、Ang-1、HBD2的浓度分别为(504.785±4.665)、(4.426±0.138)、(0.185±0.006)、(25.650±4.104)、(13.733±2.197)、(15.561±0.496)和(4.763±0.714)ng/L。hAHS的体积分数在10%~20%时均具有促进RPMVECs增殖的作用且以15%hAHS培养后第7、9天的增殖率最佳,而25%hAHS在第7、9、11天使RPMVECs增殖率小于0%hAHS组(P<0.05)。A组48和72h细胞增殖活性较N组显著增加,B组24、48和72h的增殖活性较N组显著降低;C组24、48和72h的增殖活性较B组显著升高(P<0.05)。ELISA结果显示,B组各时间点的IL-6和TNF-α的含量以及8、10、12和24h的IL-8含量均显著高于N组(P<0.05);C组10和12h的IL-6含量,8、10、12和24h的IL-8含量及各时间点的TNF-α含量均显著低于B组(P<0.05)。结论:hAHS含有促进组织修复、调节免疫反应、降低血管通透性及杀伤致病微生物的多种生长因子、细胞因子,对LPS致伤的RPMVECs增殖具有促进作用,并减少致伤后炎症因子分泌。
2015年01期 v.16 10-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 154K] - 潘宇;余细勇;吴漫茵;付小兵;蔡飒;
目的:从分子、细胞及在体水平评估DNA损伤和非DNA损伤因素诱导所得去分化源性表皮干细胞的安全性,探讨DNA损伤及其应答分子对其安全性评估的意义与机制。方法:分别采用紫外线(UV)照射和bFGF处理诱导方案诱导表皮细胞去分化。采用MTT法比较正常培养和血清培养条件下的两组去分化源性表皮干细胞的增殖能力;流式细胞术检测凋亡情况;Western blotting检测各组去分化过程中DNA损伤应答分子γ-H2AX、激活型caspase、p53、p21表达的变化;在雌性BALB/c裸小鼠右侧腋窝皮下注射人黑色素瘤细胞及两种去分化源性表皮干细胞,同时设生理盐水注射对照,30d后取瘤块称重,评估两种去分化源性干细胞的成瘤性。结果:1两种去分化源性表皮干细胞均表现出较强的增殖能力,UV照射所得干细胞具有较强的血清耐受性;2UV照射可导致表皮细胞DNA损伤和细胞凋亡,影响表皮细胞中p53和p21水平,而bFGF处理组无此作用;3两种去分化源性表皮干细胞均无体内成瘤性。结论:去分化过程中细胞DNA损伤与否是评价去分化源性干细胞安全性的较敏感的关键指标,因此bFGF处理诱导与UV照射所得的表皮干细胞相比更为安全可靠。
2015年01期 v.16 17-22页 [查看摘要][在线阅读][下载 520K] - 张振中;刘南波;刘煜凡;李基伟;付小兵;吴旭;
目的:探讨低氧处理对不同年龄C57小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的影响。方法:全骨髓法从3~6周年轻C57小鼠(年轻组)股骨和胫骨的骨髓中提取、分离BMSCs,传代至第6代,部分于37℃、5%CO2条件下中常规培养,连续5d观察细胞的形态及数目,绘制细胞生长曲线;部分细胞进行成骨和成脂诱导。另取第6代BMSCs,随机分为低氧处理组(37℃、5%O2条件下培养30min,再常规培养)和阴性对照组(不行低氧处理,仅常规培养),常规培养8h后固定细胞,结晶紫染色。观察两组细胞处理前后的数量变化。全骨髓法提取18~24个月老龄C57小鼠(老龄组)的骨髓细胞常规培养,连续12d观察细胞的形态及数目并绘制细胞生长曲线。将老龄组C57小鼠的骨髓贴壁细胞分为低氧处理组和阴性对照组,处理方法同年轻小鼠低氧处理和阴性对照组,于常规培养24h后固定细胞,结晶紫染色,观察两组细胞处理前后的数量变化。结果:年轻C57小鼠BMSCs增殖能力强,可传代至第6代,经过5d的培养细胞数量逐渐增加,并具有成骨、成脂诱导分化能力;但经低氧处理后,BMSCs呈片状脱落。老龄C57小鼠的骨髓贴壁细胞增殖能力差,经过12d的原代培养,细胞数量逐渐减少,并且只有一个集落形成;经低氧处理,贴壁细胞数量锐减,无新的集落形成。结论:低氧处理不能在体外扩增阶段提高C57小鼠BMSCs的增殖能力。
2015年01期 v.16 23-27+2页 [查看摘要][在线阅读][下载 573K] - 王彦博;赵艳琴;丁砚兰;王强;
目的:探讨血必净注射液对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:以清洁级EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因小鼠30只为SLE模型小鼠,随机分为模型组(8周龄和10周龄各5只)、8周龄治疗组(10只)和10周龄治疗组(10只)。两治疗组给予血必净注射液6.4ml/kg腹腔内注射,每日1次,连续14d。治疗14d后处死,分离脾脏,提取DC和T淋巴细胞,荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验检测T细胞孵育上清和脾组织匀浆液IL-2和TNF-α基因及细胞因子表达水平。结果:与正常对照组比较,SLE小鼠IL-4、TNF-α含量显著升高,而IL-2、IFN-γ水平明显降低,脾脏组织及T淋巴细胞IL-2的基因表达显著下降,而TNF-α基因表达则明显升高(P<0.05或P<0.01)。给予血必净注射液治疗后,与模型组比较,狼疮鼠IL-4、TNF-α含量显著降低,而IL-2、IFN-γ水平明显升高,IL-2基因表达显著升高,TNF-α基因表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。两个治疗组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血必净治疗能够将脾脏的Th2细胞转化为Th1细胞,改变Th1/Th2的比例和机体的免疫应答类型,对系统性红斑狼疮的免疫功能产生影响。
2015年01期 v.16 28-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 131K] - 姜玉峰;许樟荣;陆树良;韩春茂;冉兴无;曹烨民;温冰;谢挺;成志锋;杨川;贾黎静;鞠上;王雪梅;高虹;付小兵;
目的:通过多中心完全随机、标准治疗平行对照方法评价京万红软膏治疗糖尿病足慢性创面的疗效。方法:本研究共有11家医院参加,采用多中心完全随机、标准治疗平行对照、前瞻性临床研究设计。131例糖尿病足溃疡患者随机分为京万红软膏组67例和对照组64例,两组创面面积分别为(16.7±6.1)cm2和(15.9±8.3)cm2,创面形成时间(45.7±68.3)d和(52.5±79.6)d。两组分别用京万红软膏或复方磺胺嘧啶锌凝胶涂于创面,观察疗程均为20周。结果:两组患者年龄、糖尿病病程、血常规、肝功能、肾功能等数据差异无统计学意义。京万红组于2、5、10、15周创面愈合速率明显优于复方磺胺嘧啶锌凝胶组,以第5周、10周最为明显(P<0.01)。京万红组创面达到完全上皮化平均时间为(46.5±15.6)d,复方磺胺嘧啶锌凝胶组为(67.9±17.9)d,差异显著(P<0.05)。结论:京万红软膏与复方磺胺嘧啶锌凝胶均有促进糖尿病足创面愈合的作用,京万红软膏作用更优。
2015年01期 v.16 33-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 103K] - 颜卫峰;秦龙;刘秋旻;张颖萍;
目的:探讨ICU患者入院2周内腹泻的流行病学特点并分析其危险因素。方法:283例我院综合ICU 2013年10月-2014年8月收住的患者纳入研究。记录患者一般资料及肠内营养情况、药物使用情况,应用多元及多层统计学方法分析腹泻危险因素。结果:共283例患者、1 603个ICU住院日纳入研究。42例(15%)患者出现腹泻,共计88个ICU住院日,发生率为5.5次/百ICU住院日。腹泻平均发生在入住ICU后第6天,89%的患者(252例)腹泻天数小于4d。腹泻的危险因素包括:超过60%目标营养量的肠内营养、使用抗生素和使用抗真菌药物[相对风险分别为1.75、3.64和2.79]。超过60%目标营养量的肠内营养合并应用抗生素或抗真菌药物[相对风险分别为4.7和11.2]腹泻风险较单因素大幅增加。结论:在综合ICU入住后前2周内腹泻发生率为15%,导致腹泻发生的危险因素为超量(>60%目标营养量)使用肠内营养、使用抗生素和/或使用抗真菌药物。
2015年01期 v.16 37-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 254K] - 朱汝霞;陈冰;蒋明晖;林媛媛;
目的:探讨糖尿病与非糖尿病患者尿路感染的临床特点、病原菌分布和药敏结果的差异,以提高临床诊治水平。方法:选取我院2012年5月-2014年7月102例糖尿病尿路感染住院患者为观察组,同期99例非糖尿病尿路感染住院患者为对照组,分析两组人群的临床资料、病原菌、药敏结果以及预后的差异。结果:糖尿病合并尿路感染患者表现为无症状性菌尿者(55例,占53.92%)较非糖尿病合并尿路感染者高(9例,占9.09%;P<0.05);观察组血肌酐和尿β2微球蛋白升高患者(43例,42.16%和49例,48.04%)均明显高于对照组(15例,15.15%和21例,21.21%;P<0.05);观察组和对照组患者尿中检出的病原菌均以大肠埃希菌为主,分别占57.46%和47.62%;对照组检出大肠埃希菌对舒普深、盐酸头孢吡肟、亚胺培南、头孢他啶敏感性较高;观察组检出的大肠埃希菌对舒普深、亚胺培南、头孢他啶有较高的敏感性;观察者治愈率显著低于对照组(31.37%比90.91%),住院时间显著长于对照组[(20.51±10.17)d比(15.16±11.43)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:糖尿病尿路感染以无症状性菌尿为主要表现形式,且肾损害明显增加,应积极进行中段尿细菌培养,及早选择敏感抗菌药。
2015年01期 v.16 42-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 103K] - 熊丹;张津津;李良;翟红霞;刘润梅;殷亚昕;陈海威;李娜;王磊;赵志坤;夏云峰;
目的:评价急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)和静脉溶栓治疗对老年急性心肌梗死预后的影响。方法:我科203例老年AMI患者,32例患者接受常规治疗(对照组),98例接受静脉溶栓治疗(溶栓组),73例行急诊PCI治疗(PCI组)。比较3组血管再通率、左心室射血分数(LVEF)和病死率。结果:溶栓组梗死相关血管再通率为66.3%,PCI组为97.3%(P<0.01)。住院期间,对照组、溶栓组及PCI组间LVEF差异均有显著性(P<0.05)。3组患者住院期间病死率分别为9.4%、7.1%和4.1%,对照组与溶栓组、溶栓组与PCI组间比较差异不显著(P>0.05),但PCI组与对照组比较,P<0.05。溶栓再通和PCI成功患者住院期间LVEF和心肌缺血发生率(分别为16.9%和8.5%),差异均有显著性(P<0.05);住院期间病死率(1.5%和2.8%)无明显差异(P>0.05)。3组患者平均随访时间分别为(3.1±2.5)年、(3.6±2.4)年和(3.4±2.3)年,随访期间心梗再发率分别为23.1%、13.8%和7.4%,心肌缺血事件发生率分别为73.1%、55.2%和19.1%,需要再次行血运重建率分别为61.5%、42.5%和11.8%,LVEF值分别为0.456±0.121、0.568±0.132和0.615±0.115,病死率分别为15.4%、9.2%和5.9%,PCI组各项指标均优于对照组和溶栓组(P<0.05或P<0.01)。结论:老年AMI患者急诊PCI治疗的近期和远期预后优于溶栓治疗。
2015年01期 v.16 46-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 87K] - 周牮;李影学;迟云飞;
目的:观察应用表皮生长因子溶液冲洗封闭负压引流装置和创面治疗深Ⅱ度烧伤创面的疗效。方法:四肢深Ⅱ度烧伤患者60例,年龄18~60岁,烧伤创面面积5%~10%,随机分为治疗组和对照组。两组均采用负压封闭引流技术治疗,分别以表皮生长因子溶液(治疗组)或生理盐水(对照组)每日2次冲洗负压装置。伤后第5、10、15天更换负压装置,并观察体温变化、创面愈合率及创面完全愈合时间。结果:1治疗组11例(36.7%)患者出现发热,较对照组(12例,40.0%)差异无统计学意义(χ2=0.071,P=0.791)。2治疗组第10、15天创面愈合率[0.476 70±0.027 83和0.780 70±0.025 99]明显高于对照组[0.425 70±0.024 45比0.731 30±0.029 45],创面总体愈合时间[(19.27±1.82)d]短于对照组[(23.10±2.07)d],差异均有统计学意义(P均<0.05)。4治疗前,治疗组和对照组分别有5例和6例患者创面分泌物细菌培养阳性,治疗后两组均有2例未愈创面,其分泌物细菌培养结果均为阴性。结论:表皮生长因子溶液配合密闭式负压吸引作为负压装置冲洗剂,能促进深Ⅱ度烧伤创面愈合,提高负压封闭引流技术在深Ⅱ度烧伤创面的疗效。
2015年01期 v.16 49-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 90K] - 熊丹;翟红霞;李良;陈海威;王磊;殷亚昕;刘润梅;张津津;李娜;赵志坤;夏云峰;
目的:观察经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后使用抗血栓泵预防老年冠心病患者下肢深静脉血栓(DVT)形成的效果。方法:1 823例患者随机分为抗血栓泵组和对照组,两组围手术期均行抗凝治疗,术后制动8h。抗血栓泵组在制动期使用抗血栓泵。术后24h内观察并判断DVT形成情况及动脉穿刺处渗血、血肿、假性动脉瘤的形成。结果:抗血栓泵组DVT形成的发生率为0.1%(1/910例),明显低于对照组(2.5%,23/913例),差异具有显著性(P<0.05)。两组渗血、血肿、假性动脉瘤发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抗血栓泵是预防老年冠心病患者PCI术后DVT形成的有效辅助方法。
2015年01期 v.16 52-54页 [查看摘要][在线阅读][下载 84K]