- 刘惠玲;伍明俊;陈美霞;李美蓉;江梦溪;伍志强;卢学春;赵亚力;韩为东;付小兵;
目的:探讨并建立表皮干细胞Oct4基因的非转基因诱导方法。方法:分离培养人表皮干细胞,在培养至3~5d出现克隆性生长时加入工作浓度为10μmol/L的5-AzaC,24h后再诱导1次。采用RT-PCR方法,检测经5-AzaC刺激48h后的表皮干细胞Oct4基因转录水平。结果:PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳后,出现247bp(Oct4)和219bp(β-actin)目的片段明亮的特异性条带。结论:5-AzaC能有效激发出表皮干细胞Oct4基因的转录。
2009年02期 v.10 67-69页 [查看摘要][在线阅读][下载 222K] - 马明;张诚;刘毅;周文军;张世范;
目的:探讨不同海拔高度大鼠烫伤延迟复苏后回肠Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率和促凋亡基因Bax与T细胞增殖的变化及意义。方法:Wistar大鼠132只,分别在1517m和3848m两个海拔高度随机分为延迟复苏组(DFR,n=30)、即时复苏组(IFR,n=30)和假伤组(SG,n=6),建立30%TBSAⅢ度烫伤模型,分别于伤后6、12、24、48和72h在回盲部向近心端10cm处切取回肠组织后,于肠壁上切取所有Peyer氏结,采用TUNEL、免疫组织化学染色与图像分析技术,观察回肠Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率的变化、Bax和CD3+的表达。结果:各海拔高度DFR组凋亡率均高于IFR组,各复苏组伤后12h凋亡率最高;Bax的阳性表达位于Peyer氏结中淋巴细胞胞浆内,其表达强度各复苏组高于假伤组,随海拔高度上升Bax表达增强,高海拔组的表达强度高于低海拔组,各海拔高度DFR高于IFR组(P<0·05);CD3+的阳性表达部位位于Peyer氏结中T淋巴细胞胞膜,其表达强度各复苏组低于假伤组,随海拔高度上升CD3+表达减弱,伤后12h表达降至最低(P<0·05)。结论:高原地区烫伤延迟复苏后Bax表达增高可能是Peyer氏结T淋巴细胞凋亡率增加和T淋巴细胞数降低的重要原因之一。
2009年02期 v.10 70-73+64页 [查看摘要][在线阅读][下载 494K] - 李国芳;吴旭;付小兵;张翠萍;
目的:观察蜕皮甾酮(EDS)对人表皮干细胞增殖的影响。方法:中性蛋白水解酶-Ⅳ型胶原黏附法分离正常人包皮的表皮干细胞,免疫细胞化学法检测第3代细胞β1整合素、角蛋白19(K19)、K14、K10抗原表达以鉴定表皮干细胞。分别用EDS终浓度为0(对照组)、10、20、40、80、160mg/L的Epilife培养基培养表皮干细胞,于培养1d、2d、3d、4d时用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5二苯基溴化四唑(MTT)法于酶标仪上检测490nm处的吸光度值(A值),判定EDS对表皮干细胞体外增殖的影响。4d时采用流式细胞术检测各组细胞的周期改变,计算增殖指数(PI)。结果:免疫细胞化学法检测提示β1整合素、K19、K14抗原明显阳性,K10抗原阴性。培养1d、2d时,20、40、80mg/L组吸光度高于对照组(P<0.05),10、160mg/L组吸光度与对照组比较差异无显著性(P>0.05);培养3d、4d时,各实验组吸光度均高于对照组(P<0.05);各时间点所检测的吸光度值均以80mg/L时最高。流式细胞技术检测实验组PI值分别为40.00%、40.41%、40.96%、43.76%、40.87%,均高于对照组35.53%;实验组中以80mg/L时最高。结论:体外培养条件下EDS能促进人表皮干细胞的增殖,该促进作用在80mg/L时最为显著。
2009年02期 v.10 74-77+64页 [查看摘要][在线阅读][下载 492K] - 刘贤华;白晓东;粟永萍;
目的:观察法舒地尔(HA1077)促进创面愈合的效果,并探讨HA1077与创面愈合的量效关系,寻找出促进创面愈合的最佳剂量。方法:18只Wistar大鼠背部左右两侧致直径为2cm的圆形皮肤缺损。随机3只动物6个创面为一组,分为6组,分别给予10、20、40、80和160μmol/L盐酸法舒地尔和生理盐水(对照组)创面喷洒,每个创面0.5ml,隔日创面追加喷洒。实验3、7、10d计算伤口面积,实验10d取创面组织,观察组织学变化。结果:各组大鼠创面面积随伤后时间延长而逐渐缩小,20μmol/L组创面面积明显小于同时间点其他各组,除实验7d与80μmol/L组创面面积比较差异无显著性外,其余各时间点差异均有显著性(P<0.05)。病理学变化显示,创伤后10d,应用20μmol/L法舒地尔组创面新生肉芽组织生长及新生表皮生长速度明显优于其他各组。结论:HA1077可促进皮肤缺损创面愈合,以20μmol/LHA1077效果更为明显。
2009年02期 v.10 78-80+64页 [查看摘要][在线阅读][下载 456K] - 孙婧;肖燕;李良;余素明;唐锁勤;
目的:探讨CXCR4在神经母细胞瘤细胞LA-N-5上的表达及其对化疗药物环磷酰胺(CTX)、盐酸吡柔比星(THP)的敏感性,明确化疗药物是否能通过抑制转移相关趋化因子受体的表达发挥作用。方法:体外培养神经母细胞瘤细胞LA-N-5,流式细胞仪和PCR测定LA-N-5细胞上CXCR4蛋白和mRNA的表达。通过MTT试验明确化疗药物CTX和THP对LA-N-5细胞的效应剂量,通过Real-timePCR及流式细胞术在基因及蛋白水平检测化疗药物作用后LA-N-5细胞中CXCR4表达的变化。结果:①流式细胞术检测结果表明CXCR4分子在LA-N-5肿瘤细胞中高表达,两种化疗药物均能使其在蛋白水平表达显著降低,但两种药物之间没有协同作用。②Real-timePCR结果显示化疗药物THP能使肿瘤细胞中CXCR4mRNA的表达降低,而CTX没有此作用,二者在抑制LA-N-5上CXCR4mRNA的表达方面有协同作用。结论:CTX和THP能显著降低转移相关趋化因子受体CXCR4在神经母细胞瘤细胞LA-N-5表面的表达,提示化疗药物发挥作用的机制可能涉及其对趋化因子受体表达的影响。
2009年02期 v.10 81-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 262K] - 张慧;王彦博;王强;任建平;徐琪寿;
目的:探讨核黄素-月桂酸酯(RFL)对化疗后小肠黏膜的保护作用。方法:70只Wistar大鼠,体重210~250g,随机分4组:正常对照组(n=10)、甲氨喋呤(MTX)组(n=20)、RFL预防组(n=20)和RFL预防+甲酰四氢叶酸钙(CF)组(n=20)。化疗药选用MTX。正常对照组每日皮下注射生理盐水1ml,共3d,MTX组皮下注射MTX3.0mg.kg-1.d-1,连续3d;RFL预防组于化疗前24h肌肉注射RFL25mg/kg,给药1次;RFL预防+CF组于化疗前24h肌肉注射RFL25mg/kg,于化疗后24h皮下注射CF15mg.kg-1.d-1,共3d。观察大鼠化疗后6d和10d小肠重量、小肠绒毛高度以及小肠黏膜组织病理学的改变。结果:化疗第6天,RFL预防用药两组小肠重量[(5.85±0.67)g和(7.93±0.72)g]重于MTX组[(5.01±0.57)g,P<0.05和P<0.01];小肠绒毛高度[(274.9±50.2)μm和(304.5±60.7)μm]显著高于MTX组[(171.7±30.1)μm,P<0.01];MTX对照组小肠黏膜充血、炎细胞浸润等损伤病变明显,RFL用药两组病理学变化均较MTX组轻。化疗第10天,RFL预防用药两组小肠绒毛高度仍显著高于MTX组(P<0.01和P<0.05),小肠重量则无明显差异,且大部分动物的肠黏膜损伤病变已经恢复,仅MTX组个别动物的肠黏膜仍可见轻微病变,如绒毛相互融合。结论RFL能预防性对抗氧化性损伤,减少化疗对小肠黏膜的损害。
2009年02期 v.10 85-88+129页 [查看摘要][在线阅读][下载 480K] - 林季;颜光涛;薛辉;郝秀华;张凯;王录焕;
目的:研究瘦素(Leptin)在肝缺血/再灌注(I/R)后肾组织中的表达变化,探讨其与肝I/R介导的肾损伤的关系。方法:建立大鼠70%肝I/R模型,设立假手术和缺血60min后再灌注60、150、240、360min组,观察肾脏的病理学变化,检测各组血清尿酸、总抗氧化能力,肾Leptin蛋白及其mRNA表达的变化。结果:与假手术组比较,缺血60min/再灌注150min及再灌注240min组血清尿酸显著升高,以再灌注240min升高最为显著;再灌注240min和360min组血清总抗氧化能力显著升高,以再灌注240min升高最为显著;再灌注150、240和360min组肾Leptin蛋白表达显著升高,再灌注60、240、360min组肾LeptinmRNA表达显著升高,而再灌注150min组LeptinmRNA显著降低。病理学观察提示肝I/R早期的肾损伤较重而后期显著减轻。结论:Leptin在肝I/R后肾组织内的表达变化与肾损伤密切相关,提示它可能作为一种保护因子对抗肝I/R介导的肾损伤。
2009年02期 v.10 89-92+129页 [查看摘要][在线阅读][下载 523K] - 李富;刘文忠;雷永红;张翠萍;蔡飒;孙同柱;陈小波;包晓霞;
目的:改良传统"细胞创面"模型的制备方法,提高对"细胞创面"愈合率的统计的精确性。方法:在6孔板每一孔外底面用刀尖划上横纵坐标轴,用绿色记号笔在横轴的上、下方平行于横轴各画5条等距离的绿带。接种目的细胞,待其长满内表面时用1000μl微量移液器的吸头在纵轴的左、右平行于纵轴各划2条等距离的细胞缺损带。在观察时间点观察绿带与细胞缺损带重叠形成的"矩形区域"的宽度或面积,计算愈合率。结果:可以特定追踪观察每个"矩形区域"内"细胞创面"愈合率情况,且"矩形区域"的例数可以符合统计学要求。结论:坐标划痕法是一种较精确统计"细胞创面"愈合率可行的方法。
2009年02期 v.10 93-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 129K] - 桑金玲;张宝林;贾赤宇;李智;贾耀朋;
目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA在脓毒症大鼠外周免疫器官脾脏的表达规律及其与血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的关系。方法:采用盲肠结扎穿孔(CLP)方法制备大鼠脓毒症模型。83只大鼠随机分为正常对照组(10只)、盲肠结扎穿孔组(38只),盲肠结扎穿孔丙酮酸乙酯治疗组(35只)。分别于CLP术后4、12、24、48、72h或CLP术后丙酮酸乙酯治疗12、24、48、72h活杀动物,留取脾脏组织和血清标本,用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测脾脏组织HMGB1mRNA的表达规律,用放射性免疫方法检测血清TNF-α和IL-6的浓度。结果:HMGB1mRNA在正常大鼠脾脏组织有轻度表达,CLP术后表达显著增强(P<0.05)。CLP术后24h和72h分别出现两个高峰。丙酮酸乙酯液治疗可显著降低CLP术后大鼠脾脏组织HMGB1mRNA的表达(P<0.05)。CLP术后大鼠血清TNF-α和IL-6浓度显著增高(P<0.05),丙酮酸乙酯治疗可显著降低CLP术后大鼠TNF-α和IL-6的浓度(P<0.05)。结论:HMGB1在脓毒症大鼠外周免疫器官脾脏的表达显著增高,并与血清TNF-α和IL-6等炎症因子的增高有重要关系;HMGB1参与了失控性炎症反应的发展过程。
2009年02期 v.10 95-98页 [查看摘要][在线阅读][下载 130K] - 王昆;闫亮;
目的:探讨应用干扰素α1b治疗慢性乙型肝炎(乙肝)患者改善其肝纤维化情况的疗效观察。方法:2005年3月-2008年2月期间门诊经病理确诊的慢性乙肝致肝纤维化患者96例,随机分为干扰素治疗组(46例)和对照组(50例),两组均给予常规中药保肝降酶治疗,干扰素治疗组加用干扰素α1b(商品名运德素)50μg肌肉注射,隔日1次,疗程均为24周。观察两组患者症状、体征,肝功能指标如丙氨酸转氨酶(ALT)、胆红素(BIL)、白蛋白(A)和白蛋白/球蛋白比例(A/G),以及肝纤维化指标血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ前型胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(CⅣ)的变化。结果:与对照组比较,干扰素治疗组治疗后腹胀、肝区疼痛、脾肿大、肝肿大等临床症状和体征明显改善(P<0.05),ALT[(55.7±20.2)U/Lvs.(133.4±56.3)U/L,P<0.01]、BIL[(32.9±21.5)μmol/Lvs.(46.7±26.8)μmol/L,P<0.01]水平下降明显,血清A[(41.8±7.5)g/Lvs.(37.9±7.8)g/L,P<0.01]和A/G(1.8±0.6vs.1.7±0.3,P<0.01)显著升高,HA[(101.8±50.2)ng/mlvs.(149.9±54.3)ng/ml,P<0.01]、LN[(93.3±23.7)ng/mlvs.(122.1±37.4)ng/ml,P<0.01]、CⅣ[(104.6±23.1)ng/mlvs.(107.3±34.7)ng/ml,P<0.01]和PCⅢ[(190.7±59.0)ng/mlvs.(260.1±83.5)ng/ml,P<0.01]等肝纤维化指标也明显下降,干扰素治疗组与对照组比较各检查指标差异均有显著性。结论:应用干扰素α1b治疗慢性乙肝致肝纤维化患者对改善患者临床症状、体征,促进肝功能恢复,改善其肝纤维化有显著疗效。
2009年02期 v.10 99-101页 [查看摘要][在线阅读][下载 94K] - 谢晓玮;肖燕;韩根成;文仲光;
目的:观察Th1、Th17型细胞因子在肺部感染性疾病中的动态变化,深入探讨机体抵抗肺部感染的免疫机制,为肺部感染性疾病的特异性诊治提供实验依据。方法:收集临床肺部感染患者血清、外周血淋巴细胞样本,分别用ELISA方法检测血清中Th1型细胞因子(IFN-γ)及Th17型细胞因子白细胞介素-17(IL-17)的表达水平,用FACS检测外周血中CD4+IFN-γ+Th1及CD4+IL-17+Th17细胞的比例变化,同时用Realtime-PCR方法检测外周血中Th17型细胞因子IL-17在基因水平的表达变化。以上指标的检测均以临床公认的CRP水平的变化作为参考。结果:ELISA结果显示,肺部感染患者血清IFN-γ的水平较健康对照组显著升高,动态检测结果显示IFN-γ变化水平与反映临床疾病状态的CRP出现显著的相关性。而IL-17的表达在不同的疾病过程未出现显著的变化。FACS及Real-time-PCR结果均显示CD4+IFN-γ+Th1的活性变化与疾病状态相关,而CD4+IL-17+Th17细胞在肺部感染不同阶段未出现显著的变化。结论:相对于Th17细胞而言,Th1细胞在机体防御肺部感染的过程中发挥更为关键的作用。Th17细胞在该类感染性疾病中的作用尚需进一步探讨。
2009年02期 v.10 102-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 202K] - 马学华;刘东海;于光远;王宁;张恩君;钦军;刘琼;王雷;周艳;
目的:提出推进医院外事管理系统化、高效化及可持续发展的新思路。方法:分析目前医院外事管理的现状、存在的问题,及所面临的挑战和机遇。结果:目前,医院外事管理的主要问题是体制机制不完善及缺乏目标规划。结论:加强统筹规划及评估工作有助于推进医院外事管理系统化、高效化和可持续发展。
2009年02期 v.10 105-107页 [查看摘要][在线阅读][下载 75K] - 蔺海龙;刘凤彬;田宝祥;
目的:探讨脱细胞异体真皮在烧伤后期瘢痕修复中的应用价值。方法:2006年2月-2007年2月入院治疗的21例烧伤后遗留瘢痕患者(A组),采用切开并充分松解挛缩的瘢痕组织,利用脱细胞异体真皮加自体刃厚皮移植于继发创面的方法治疗。随机抽取同期21例采用瘢痕松解切除后进行中厚皮移植的患者(B组)及21例进行次全厚皮移植的患者(C组)作对照,比较3组患者的皮片成活情况以及术后1年的随访情况。结果:A组中皮片坏死率较其余两组略高;1年后随访发现,A组在受皮区皮片挛缩程度,外观平整度、色素改变及供皮区瘢痕形成方面均明显优于B组,与C组相当;C组仅适用于较小瘢痕的修复。结论:脱细胞异体真皮加自体皮复合移植是烧伤后期瘢痕修复的有效手段。
2009年02期 v.10 108-110页 [查看摘要][在线阅读][下载 85K]